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常见细菌/病毒以及实验简述

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常见细菌以及实验简述

一、细菌培养与灭菌实验大致实验过程简述

 1. 实验材料 生理盐水,接种菌液,动物性蛋白胨,琼脂,接种环,灭菌设备, 恒温箱,NaCl/NaOH 溶液与常规实验室器皿。

 2. 实验简述 根据培养不同细菌种类,配置相对应培养基(牛肉膏蛋白胨、骨 蛋白胨等),调节 PH,20 分钟湿热灭菌/干热灭菌处理,无菌箱 接种,恒温箱培养 5-7D,进行指定实验条件进行灭菌实验,灭菌 处理标本。 

二、常见实验菌种,可能导致疾病,常规灭杀方式及传播途径。 

  1. 葡萄球菌类 --主要致病菌有金黄色葡萄球菌,白色葡萄球菌。 --主要是在家禽孵化、饲养、加工环境中普遍存在。 --可能导致人体血栓、休克、呕吐、腹泻、皮肤坏死等临床现象。 --可通过湿热灭菌/干热灭菌。

    2.大肠杆菌 --主要在家畜、家禽、养殖经济动物以及其他陆生动物和某些水 产动物之间传播,其中猪与鸡最易感染,危害极大。 --可能导致胃肠道感染,尿道感染、关节炎、脑膜炎以及败血型 感染等。 --可通过湿热灭菌/干热灭菌。 

    3. 白色念珠菌 --念珠菌是一种腐物寄生菌,广泛存在于自然界。是人体正常菌 群之一,平时主要生存于人体的口腔、皮肤、粘膜、消化道、生 殖器及其他脏器中。 --通常会应免疫力下降而导致念珠菌繁殖,比较常见引发阴道炎、 龟头炎等炎症。 --可通过湿热灭菌/干热灭菌。

    4. 绿脓杆菌 --广泛分布于自然界及正常人皮肤、肠道和呼吸道,甚至植物上 也广泛存在。 --可能导致皮肤和皮下组织感染,中耳炎、脑膜炎、呼吸道感染、 尿道感染、败血症等。 --可通过湿热灭菌/干热灭菌。 

    5. 其他致病菌种等(包括沙门氏菌,变形杆菌,副溶血性弧菌, 肉毒梭菌,链球菌,霍乱弧菌,志贺氏菌属) 以上都为卫生部办公厅通知文函中明确列出关注致病菌种,但大 多是条件菌种,且多是通过皮肤接触,呼吸道传播,食物传播, 与生活密切相关,大多可通过湿热灭菌/干热灭菌。 

病毒以及实验简述

 一、病毒培育与灭活实验大致实验过程简述 

  1. 实验材料 实验用病毒株,宿主细胞,细胞培养瓶与 96 孔培养板,恒温水 浴箱,二氧化碳培养箱,层流超净工作台,-80℃低温箱,二氧 化碳培养箱,液氮,离心设备,移液器,细胞维持培养基,细胞 完全培养基,去离子水等。

     2.实验过程 病毒悬液制备:实验组,阳性对照组,阴性对照组。病毒培育需 每日观察细胞与宿主细胞生长情况,接种细胞,病变收获病毒, 每组按照指定条件设置病毒灭杀实验验证,并每组进行噬斑病毒 感染滴度测定。平均灭活对数值计算,评价。 

二、常见病毒株介绍 

  1. 冠状病毒 HCov-229E(七种已知冠状病毒其一) --冠状病毒仅感染脊椎动物,与人和动物的多种疾病有关,感染 可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭,甚至死亡。 --根据生物系项目组已有实验数据表明,常温 30-50%湿度下更易 存活,6 天后病原体存活率在近 20%,湿度不变条件下,温度越 低更易存活。湿度达到 80%,随着温度越高,病毒存活率越低。

    2. 流感病毒(包括 H1N1,H3N2,H9N2,H7N3,H6N2,H9N1, H7N7,H6N6,H7N8 等皆为家禽病毒,症状类似,以下主要介绍 H1N1) --原称人感染猪流感,感染者会出现发烧、咳嗽、疲劳、食欲不 振等,严重致死。甚至可通过气溶胶、空气飞沫传染、接触传染。 常发生在冬春季节。 --根据生物系项目组已有实验数据表明,针对空气灭活,单纯 365nm 紫外无明显灭活效果,室温荧光催化条件下 60min 灭活率 可达 87.5%,180min 灭活可达 100%,此外高温也可以使病原体 核酸失活,达到灭活效果。 

    3. 高危病毒 H5N1/H7N9 --此两种病毒传播途径主要通过鸡鸭与鸟类,感染者发热,咳嗽, 少痰,可伴有头痛、肌肉酸痛和全身不适。重症体温大多持续在 39℃以上,出现呼吸困难,可伴有咯血痰等。 --根据项目组其中一条实验数据,4℃条件下,湿性标本与干性标 本环境中病原体存活时间均大于 58 天,25℃下,湿性标本中,病原 体存活时间分别为 20 天左右,干性标本中病原体存活时间都缩 短至 10 天左右,36℃下,湿性标本中病原体存活时间分别为 8 天 和 7 天;干性标本中, 病原体存活时间都在 4 天左右。所以烤鸡烤 鸭比较合适! 

   4. 肠道病毒属(包括 Ev71,CA16,COXB3,脊髓灰质炎病毒等) --人是肠道病毒的唯一自然寄主,粪-口是主要的传播途径。偶 然也可以通过飞沫传播。隐性感染甚为普遍﹐人受染后出现临床 症状的也是少数。病原体到达靶器官后,引起相应式临川症状。 --通常通过高锰酸钾,紫外线照射,漂白粉等手段灭杀 

   5. 人乳头瘤病毒(包括 HPV6,HPV16,HPV18 等) --世卫致癌清单病毒株,主要通过性传播途径,密切/间接接触, 医源性感染,母婴传播。 --主要通过激光,电疗,光动力,微波,药物治疗与灭杀手段等。

   6. 单纯疱疹病毒 --HSV 人是其唯一的自然宿主,存在于病人、恢复者或者是健康 带菌者的水疱疤液、唾液及粪便中,传播方式主要是直接接触传 染,亦可通过被唾液污染的餐具而间接传染。比较容易感染新生 儿,儿童等免疫力不高的人群,对动物的感染很是宽泛。 --HSV 的灭活一般通过直接紫外光照射,5-10 分钟,高温环境灭 杀,乙醇等溶剂均可灭活。 

    7. 麻疹病毒 --麻疹是儿童常见的一种急性传染病,其传染性很强,以皮丘疹、 发热及呼吸道症状为特征。 --外界环境中抵抗力不算强,对干燥、日光、高温和一般消毒剂 都没有抵抗力。在室温下仅存活 2 小时,56℃时 30 分钟即被破 坏。4℃环境下可存活 5 个月。

    8.呼吸道合胞病毒 --呼吸道合胞病毒是一种 RNA 病毒,属副粘液病毒科。该病经空 气飞沫和密切接触传播。多见于新生儿和 6 个月以内的婴儿。 --实验数据表明,特定的甲醛,多聚甲醛等能有效灭活。 

    9.人乙型流感病毒 --乙型流感病毒仅在人之间转播,是急性呼吸道传染病,通常有 肌炎及胃肠道症状。主要通过飞沫传播为主或日用品接触。 --通常通过高温灭活,消毒剂灭活等实验手段 10.腺病毒,PRV 伪狂犬病毒,登革病毒 2 型,鼻病毒,大肠杆 菌噬菌体,人免疫缺陷病毒,副流感病毒 以上病毒多数传播途径比较苛刻,属于医学临床研究,传播途径 多数为人体呼吸道,粪口传播等,主要以预防为主,灭活主要主 要以特定浓度试剂消毒剂,Y 射线,药物等。




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